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          淺談凱氏定氮法測定食品中蛋白質注意事項

           發布時間:2022-03-31 點擊量:222

          凱氏定氮法測定中各步驟的反應方程式 

          (1)消化

          2NH2 (CH2) 2COOH + 13H2SO4 =Δ(NH4 ) 2SO4 + CO2  + SO2  + 16H2O 

          (2)蒸餾

          在消化完全的樣品溶液中加入濃氫氧化鈉是呈堿性 ,加熱蒸餾即可釋放出氨氣 ,其反應方程式如下:

          NaOH + (NH3) 2SO4 = 2NH3 + Na2SO4 + H2O 

          (3)吸收

          加熱蒸餾所放出的氨,可用硼酸溶液進行吸收 ,其反應方程式如下:

          2NH34H2BO3 = (NH4) 2B4O7 + 5H2O

           (4)滴定

          (NH4) 2B4O7 + 5H2O + 2HCl = 2NH4Cl + 4H3BO3

          (NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3
          現在隨著實驗室儀器的發展,多數手工操作都被凱氏定氮儀取代

           

          凱氏定氮儀檢驗中應注意的事項 

          (1)樣品應盡量選取具有代表性的 ,大塊的固體樣品應用粉碎設備打得細小均勻 ,液體樣要混合均勻。

          (2)稱量放入消化管時應小心 ,不要讓樣品粘附在管壁上 ,否則會使管壁上粘附的含氮化合物在無硫酸存在的情況下未消化完全而造成氮損失。

          (3)消化過程中不要用強火 ,特別是樣品脂肪或糖含量較高時 ,消化過程中易產生大量泡沫 ,強火會使樣品溢出管外或濺起粘附在管壁上無法消化完全而造成氮損失,因此應在開始消化時用小火加熱 ,保持和緩沸騰。北京優譜通用科技有限公司生產的消化爐熱傳導效率高、立體環繞加熱受熱均勻,程序性升溫可避免該問題。

          (4)消化過程中要不時轉動消化管 ,以便利用冷凝酸液將附在管壁上的固體殘渣洗下并促進其消化完全。

          (5)樣品中脂肪含量過高時 ,要增加硫酸的量 ,因消化時脂肪消耗硫酸量大 ,使硫酸缺少不能生成硫酸銨造成氮損失。

          (6)消化至液體澄清透明后只需繼續加熱 1.5-1h 即可 ,加熱過久 ,硫酸不斷被分解 ,水分不斷逸出而使硫酸鉀濃度增大 ,沸點升高 ,易使已生成的銨鹽發生熱分解放出氨而造成損失 ,特別是蛋白質含量低的食品因此而無法測定。

          (7)在蒸餾前應檢查氫氧化鈉溶液、硼酸溶液是否足量,避免因堿液、酸液不足造成氨不能逸出、不被吸收而影響測定結果。

          (8)滴定用的標準酸必須按照標準配制和標定 ,標準酸濃度的準確度將影響檢驗數據的準確性。

          (9)為了提高檢測數據的準確性 ,減少隨機誤差 ,對樣品進行滴定檢測時一定要進行平行試驗。北京優譜通用科技有限公司的1800系列定氮儀采用穩定可靠的紅、綠、藍三基色判斷終點,有效避免了終點誤判造成的誤差,同時提高了數據的準確性和穩定性。

          凱氏定氮法測定食品中蛋白質含量的步驟較多 ,在檢驗過程中應注意以上事項 ,減少在各步驟中的實驗誤差 ,以提高檢測結果的準確度。

           


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